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《更年健體膠囊對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)功能影響的實(shí)驗(yàn)研究》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在工程資料-天天文庫。
1、更年健體膠囊對(duì)小鼠免疫調(diào)節(jié)功能影響的實(shí)驗(yàn)研究【摘要】目的觀察更年健體膠囊的免疫調(diào)節(jié)作用。方法各組動(dòng)物每天灌胃一次[灌胃容量均為0.2ml/(10gbmunologicfunctioninmice.MethodsAllanimalsinistration30dayssuccessively[0.2ml/(10gbinedtheseindexesarkablyincreasedtheclearancerateofivcharcoalparticlesandthenumbersofPFC,butthecellularimmunity
2、hasnosignificantchanged.ConclusionGengnianjianticapsulecouldimprovetheimmunityofmice. 【Keyice;immuneregulation 更年健體膠囊系由麥冬、五味子等多味補(bǔ)益藥物依據(jù)中醫(yī)組方的基本原則組成的中藥方劑。我們從免疫藥理學(xué)的角度就該膠囊對(duì)小鼠免疫功能的調(diào)節(jié)作用進(jìn)行觀察職稱論文?! ?材料與試劑 1.1動(dòng)物 由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供健康成年二級(jí)昆明種雌性小白鼠40只(醫(yī)動(dòng)字08-013號(hào)),體重18~22g。飼料、墊料來
3、源同上?! ?.2藥品 更年健體膠囊內(nèi)容物為棕褐色粉末,由陜西利威爾制藥有限公司提供。人體推薦量為每人每日4g[4g/(kgbiddot;d)]。用蒸餾水配制各劑量濃度?! ?.3儀器與試劑 SRBC、印度墨汁、瓊脂糖、扭力天平、離心機(jī)、CO2恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴箱、培養(yǎng)皿、小牛血清、HankS液、MTT液、ConA、RPMI1640培養(yǎng)液、甲醇、丙酮、酸性異丙醇、血球計(jì)數(shù)盤、752-C紫外可見分光光度計(jì)、24孔培養(yǎng)板、補(bǔ)體(豚鼠血清)等。 2方法 2.1動(dòng)物分組及劑量選擇 將120只雌性小鼠共分4項(xiàng)試驗(yàn)。每項(xiàng)用40
4、只小鼠并隨機(jī)分為四組,每組10只。各項(xiàng)試驗(yàn)的劑量設(shè)計(jì)均為:120、60和30g/(kgbl/(10gbes;106個(gè)/ml,按照程序中MTT法進(jìn)行淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng),最后在752-C紫外可見分光光度計(jì)570nm波長處測(cè)其光密度值(OD),計(jì)算ConA+與ConA-各孔的光密度值差,結(jié)果與對(duì)照組比較進(jìn)行方差分析?! ?.2.2抗體生成細(xì)胞檢測(cè) (PFC)于灌胃第25天給小鼠腹腔注射2%SRBC0.2ml/只,于免疫后第5天處死,解剖取脾制備脾細(xì)胞懸液,用RPMI1640完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為5106個(gè)/ml,按程序方法制備瓊脂
5、糖玻片,在二氧化碳培養(yǎng)箱中溫育(37℃、5%CO2)1.5h后加補(bǔ)體,再溫育1.5h。計(jì)數(shù)每張瓊脂薄層板上形成的溶血空斑數(shù),結(jié)果與對(duì)照組比較進(jìn)行方差分析。 2.2.3小鼠碳粒廓清試驗(yàn) 按順序給各組小鼠尾靜脈注射印度墨汁(4倍稀釋)0.1ml/(10gbin及10min分別準(zhǔn)時(shí)內(nèi)眥采血20μl,并迅速加入到2ml0.1%碳酸鈉溶液中并搖勻。以752-C紫外可見分光光度計(jì)600nm波長處測(cè)光密度值(OD)。同時(shí)取小鼠肝、脾稱重,按公式計(jì)算吞噬指數(shù)(a),結(jié)果與對(duì)照組比較進(jìn)行方差分析?! ?.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)均用s
6、pss10.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理,組間比較用t檢驗(yàn)?! ?結(jié)果 3.1ConA誘導(dǎo)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn) (MTT)見表1。表1更年健體膠囊對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)(MTT)的影響各劑量組小鼠ConA+與ConA-OD差值與對(duì)照組間差異均無顯著性(P>0.05),提示更年健體膠囊對(duì)小鼠細(xì)胞免疫未見明顯影響?! ?.2抗體生成細(xì)胞檢測(cè) (PFC)見表2。表2更年健體膠囊小鼠抗體生成細(xì)胞試驗(yàn)結(jié)果各劑量組溶血空斑數(shù)均高于對(duì)照組,其中高、中劑量組小鼠溶血空斑數(shù)與對(duì)照間差異均有顯著性(P<0.01、P<0.05),低劑
7、量組小鼠溶血空斑數(shù)與對(duì)照組間差異均無顯著性(P>0.05)。表明更年健體膠囊可明顯提高小鼠體液免疫。 3.3小鼠碳粒廓清試驗(yàn) 見表3。表3更年健體膠囊小鼠碳廓清試驗(yàn)結(jié)果高、中、低劑量組小鼠碳廓清吞噬指數(shù)均高于對(duì)照組,其中高、中劑量組小鼠廓清吞噬指數(shù)與對(duì)照組間差異均有顯著性(P<0.05、P<0.01)。結(jié)果表明更年健體膠囊可以明顯增加小鼠巨噬細(xì)胞系統(tǒng)的吞噬能力,且具有一定的量效關(guān)系。 4討論 免疫功能是機(jī)體的一種重要防御機(jī)制,有研究證明機(jī)體氣虛時(shí)這一功能顯著低下。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果顯示,由麥冬、五味子等中
8、藥組方的更年健體膠囊能顯著提高小鼠的體液免疫和非特異性免疫,作用于機(jī)體免疫系統(tǒng)的不同環(huán)節(jié),具有顯著的免疫調(diào)節(jié)作用。單核-巨噬細(xì)胞吞噬能力是衡量機(jī)體非特異性免疫功能的標(biāo)志之一[2],而巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)和吞噬百分?jǐn)?shù)則可以反映其吞噬功能的強(qiáng)弱[3~5]。本實(shí)驗(yàn)證實(shí):更年健體膠囊可顯