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《復(fù)方五仁醇膠囊保肝作用的實驗與臨床研究》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、復(fù)方五仁醇膠囊保肝作用的實驗與臨床研究作者：朱浩然竇志華羅琳張兵李民達(dá)坤林【摘要】目的考察復(fù)方五仁醇膠囊對損傷肝細(xì)胞的保護(hù)作用及對慢性肝炎的治療效果。方法以SD大鼠為供體制備復(fù)方五仁醇膠囊含藥血清，CCl4誘導(dǎo)大鼠原代培養(yǎng)肝細(xì)胞損傷模型，采用血清藥理學(xué)方法考察含藥血清對損傷肝細(xì)胞增值（MTT法）和培養(yǎng)上清液中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）的影響；將446例慢性乙型肝炎患者隨機(jī)分成治療組和對照組，以臨床癥狀、體征、肝功能為主要指標(biāo)，考察復(fù)方五仁醇膠囊的治療效果。結(jié)果與模型組比較，含藥血清組MTT值明顯升高，上清液中ALT均顯著
2、下降，體系中加入10%含藥血清效果最佳；治療組、對照組臨床癥狀、體征及肝功能指標(biāo)均明顯得到改善，復(fù)方五仁醇膠囊的療效優(yōu)于陽性對照藥護(hù)肝片。結(jié)論復(fù)方五仁醇膠囊對肝細(xì)胞損傷具有明顯保護(hù)作用，對慢性肝炎有較好治療作用?！娟P(guān)鍵詞】復(fù)方五仁醇膠囊；保肝作用；血清藥理學(xué)；臨床觀察 Abstract：ObjectiveToinvestigatetheprotectiveeffectofthepoundTT)andalanineaminotransferase(ALT)concentrationincellculturemediumi
3、ned.446patientsentalgroup(treatedbyCTTincrementanddepressALTsignificantly,ptomandliverfunctionofpatientsinexperimentalandcontrolgroupsprovedaftertreatment,andthetherapeuticeffectofC21）；乙二醇雙（2-氨基乙醚）四乙酸（EGTA，美國AMRESCO公司分裝,批號0732）；膠原酶IV（美國Sigma公司分裝,批號0406）；胰蛋白酶（美國Si
4、gma公司分裝,批號030702）；DMEM培養(yǎng)基（美國GIBCO公司,批號1255136）；新西蘭新生小牛血清（美國HyClone公司，批號DPEO166）；溴化3-（4,5-二甲基噻唑）-2,5-二苯基四氮唑藍(lán)（MTT，AMRESCO公司,批號1324B37）；四氯化碳（宜興市第二化學(xué)試劑廠，批號20010608）；復(fù)方五仁醇膠囊（本院自制，批號050505）；HERAcellCO2培養(yǎng)箱（德國GmbH公司）；BT-200B數(shù)顯恒流泵（上海滬西分析儀器廠）；BIO-TEK340酶標(biāo)儀（美國Sigma公司）；日立717
5、0全自動生化分析儀（日本日立公司）?！ ?.1.2含藥血清、空白血清的制備SD大鼠4只，禁食12h(自由飲水)，稱重，每天按照4.50ml/kg（相當(dāng)于成人臨床等效劑量的10倍）分兩次灌胃復(fù)方五仁醇膠囊甲醇提取物的0.5%CMC-Na混懸液，連續(xù)給藥3d。末次給藥后2h以3%戊巴比妥鈉1.5ml/kg腹腔注射麻醉，頸總動脈取血，置冰箱4℃冷藏過夜，分離血清，即為含藥血清。SD大鼠每天0.5%CMC-Na4.50ml/kg灌胃，同法制備空白血清。 1.1.3肝細(xì)胞的分離與培養(yǎng)大鼠用3％戊巴比妥鈉1.5ml/kg腹腔注射麻
6、醉，門靜脈插管，以37℃無鈣灌流液（組成：HBSS500ml，HEPES1.19g，EGTA0.095g，NaHCO30.175g，pH7.4）灌流約20min后，換用37℃的通氧膠原酶灌流液（組成：HBSS100ml，HEPES0.238g，CaCl20.07g，膠原酶IV0.075g，胰蛋白酶0.01g，NaHCO30.035g，pH7.4）繼續(xù)灌流10min后取下肝臟，剪開肝包膜，將肝細(xì)胞懸液過濾清洗后懸浮于含10％新生小牛血清的DMEM培養(yǎng)基中，并用臺盼藍(lán)染色法檢測細(xì)胞活力達(dá)90％，以1×105/cm2接種于96
7、孔及48孔板中，置CO2培養(yǎng)箱（5％CO2）37℃培養(yǎng)?！ ?.1.4肝細(xì)胞的分組與處理培養(yǎng)24h后，吸棄上清液，隨機(jī)分成6組（正常組、模型組及5%，10%，20%，40%含藥血清組），每組設(shè)6個復(fù)孔。模型組和各含藥血清組更換為加入CCl410mmol/L的DMEM培養(yǎng)液，正常組相應(yīng)加入DMEM培養(yǎng)基，正常組和模型組加入終濃度為10％的空白血清，5%，10%，20%，40%含藥血清組加入含藥血清，使終濃度分別為5%，10%，20%和40%。作用24h后，收集48孔板中培養(yǎng)上清液檢測ALT。96孔板中每孔加入5mg/ml的
8、MTT液20μl，繼續(xù)孵育4h，每孔再加入DMSO200μl，振蕩，使結(jié)晶物充分溶解，用酶標(biāo)儀于檢測波長570nm，參比波長655nm測定各孔吸光度（A）。 1.1.5統(tǒng)計學(xué)處理數(shù)據(jù)以±s表示，使用ol/L。病例隨機(jī)分成兩組，其中治療組264例，對照組182例。兩組在年齡性別病情及病程方面具有可比性(P>0.
