高劑量lps對哮喘小鼠血清il-4、il-8及肺組織vegf表達的影響

高劑量lps對哮喘小鼠血清il-4、il-8及肺組織vegf表達的影響

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1、鄭州大學碩士學位論文高劑量LPS對哮喘小鼠血清IL--4、IL--8及肺組織VEGF表達的影響姓名:馮梅晶申請學位級別:碩士專業(yè):兒科學指導教師:欒斌201205摘要高劑量LPS對哮喘小鼠血清IL.4、IL.8及肺組織VEGF表達的影響碩士研究生:馮梅晶導師:欒斌專業(yè):兒科學鄭州大學第三臨床學院河南鄭州450052摘要支氣管哮喘是一種以氣道炎癥和氣道高反應性為基本特征的變態(tài)反應性疾病,其發(fā)病機制復雜,目前仍未完全明確,多種細胞因子和炎癥介質(zhì)參與其發(fā)生、發(fā)展的調(diào)節(jié),并在氣道重塑過程中發(fā)揮重要的作用。T

2、細胞可以定向分化為THl、TH2細胞,正常情況下,THl、TH2細胞保持相對平衡狀態(tài),哮喘發(fā)生時,存在Till廠TH2免疫平衡被打破的情況,TH2型免疫過度表達,THl免疫應答減弱。近年來,越來越多的研究表明兒童的過敏性特征及哮喘發(fā)生率與其周圍環(huán)境中細菌內(nèi)毒素水平呈負相關(guān)。適量細菌毒素的接觸,有望減少兒童過敏性疾病及哮喘的發(fā)生率,從而為哮喘的輔助治療尋求新的靶點。細菌脂多糖(LipopolysaccharideLPS)作為一種免疫調(diào)節(jié)劑,可以下調(diào)TH2型免疫應答。II,4能誘導嗜酸性粒細胞、肥大細胞

3、釋放lgE,在哮喘速發(fā)相反應中發(fā)揮重要作用。IL-8可趨化炎癥細胞的聚集,延長中性粒細胞的存活時間,加重肺損傷,還可與IL-3協(xié)同促進釋放白三烯和組胺,介導不依賴IgE的變態(tài)反應,引起遲發(fā)型哮喘。目的本實驗通過檢測哮喘小鼠血清II廣4、IL-8及肺組織VEGF表達,探討IL廣4、IL-8及VEGF在哮喘發(fā)生發(fā)展及氣道重塑過程中的作用,明確高劑量LPS干預對其影響,力求對支氣管哮喘的預防及控制尋求新的手段,更好的改善哮喘患摘要者的生活質(zhì)量。實驗方法27只健康清潔級雌性BALB/c小鼠,隨機分為三組:對

4、照組(A組)、哮喘組(B組)、高劑量LPS干預組(C組),每組9只。哮喘模型的建立:B組于實驗第1天、第8天和第15天腹腔注射卵蛋白/氫氧化鋁混懸液0.2mL(含卵蛋白20pg,氫氧化鋁1mg)致敏,并每隔2天腹腔注射生理鹽水lmL,第22天開始隔日腹腔注射lmL生理鹽水,1h后應用2%OVA生理鹽水霧化吸入激發(fā),共激發(fā)7次,每次持續(xù)30rain。C組在致敏階段每隔2天腹腔注射1mL含100lagLPS溶液,激發(fā)階段在每次激發(fā)前1h腹腔注射相同劑量濃度LPS。A組致敏與激發(fā)均以等量的生理鹽水代替OV

5、A/AI(OH)3混懸液、OVA、LPS。末次霧化結(jié)束后24小時內(nèi)收集lmL全血,進行ELISA檢測,摘取右肺中葉進行HE染色及VEGF免疫組化檢測。所有實驗數(shù)據(jù)均應用SPSSl7.0進行分析。各組資料用均數(shù)±標準差(石±S)來表示,三組樣本均數(shù)間的比較采用非參數(shù)檢驗,P<0.05時差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果1HE染色結(jié)果哮喘組小鼠氣道壁增厚,管腔狹窄變形,平滑肌層增厚,杯狀細胞增生,氣管周圍炎性細胞浸潤明顯。高劑量LPS干預組氣道壁增厚程度及炎癥細胞浸潤程度較哮喘組減輕,對照組肺組織結(jié)構(gòu)基本正常。2免

6、疫組化結(jié)果陽性表達呈現(xiàn)棕黃色,表達部位主要集中于氣道上皮細胞、氣道平滑肌細胞的胞漿。哮喘組小鼠肺組織VEGF呈強陽性表達,高劑量LPS干預組小鼠陽性反應較哮喘組少,而對照組呈弱陽性表達。3ELISA的結(jié)果哮喘組血清IL4、IL-8含量高于高劑量LPS干預組和對照組,差異有統(tǒng)計學摘要意義,高劑量LPS干預組血清IL4、IL-8含量與對照組相比,差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)論1.高劑量LPS能減輕哮喘發(fā)作嚴重程度,減輕氣道炎癥2.高劑量LPS能減少氣道血管重塑的發(fā)生關(guān)鍵詞:小鼠哮喘氣道重塑LPSlL4IL-8V

7、EGFIIIAbstractHighdosesofLipopolysaccharideonAsthmainMouseSerumIL-4,IL-8andVEGFinPulmonaryTissueExlaInfluenceExpression1n11RenPostgraduate:Mei-JingFengSupervisorProf:BinLuanProfession:PaediatricsTheThirdAffiliatedHospitalofZhengzhouUniversityZhengzhou,

8、Henan450052,ChinaBronchialasthmaisairwayinflammationandairwayhyperresponsivenessinallergicdiseases,ofwhichpathogenesisiscomplexandnotyetcompletelyclear,withavarietyofcytokinesandinflammatorymediatorsinvolvedinitsoccurrence,regulationofd

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