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《國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)：gb 541316-2010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中葉酸（葉酸鹽活性）的測(cè)定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB5413.16—2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒食品和乳品中葉酸（葉酸鹽活性）的測(cè)定NationalfoodsafetystandardDeterminationoffolicacid(folateactivity)infoodsforinfantsandyoungchildren,milkandmilkproducts2010-03-26發(fā)布2010-06-01實(shí)施中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布GB5413.16—2010前言本標(biāo)準(zhǔn)代替GB/T5413.16-1997《嬰幼兒配方食
2、品和乳粉葉酸（葉酸鹽活性）測(cè)定》。本標(biāo)準(zhǔn)與GB/T5413.16-1997相比，主要變化如下：——對(duì)磷酸鹽緩沖液作了調(diào)整；——增加了米粉的處理方法；——增加了光密度法測(cè)定步驟。本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：——GB5413-1985、GB/T5413.16-1997。IGB5413.16—2010食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)嬰幼兒食品和乳品中葉酸（葉酸鹽活性）的測(cè)定1范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中葉酸（葉酸鹽活性）的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中葉酸（葉酸鹽活性）的測(cè)定。2規(guī)范性引用文件本標(biāo)
3、準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。3原理利用干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei）ATCC7469對(duì)葉酸的特異性，在含有葉酸的樣品中生長(zhǎng)產(chǎn)生的酸度和形成的光密度來(lái)測(cè)定葉酸的含量。4試劑和材料除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為GB/T6682規(guī)定的二級(jí)水。4.1雞胰腺：稱取100mg干燥的雞胰腺，加20mL蒸餾水，攪拌15min，離心10min（3000
4、轉(zhuǎn)/分鐘），取上清液，臨用前配制。4.20.9%生理鹽水：稱取9.0g氯化鈉溶解于1000mL水中，分裝于具塞試管中，每管10mL，121℃滅菌15min。每周準(zhǔn)備一次。4.3磷酸鹽緩沖液4.3.1磷酸鹽緩沖液Ⅰ（0.05mol/L）：稱取5.85g磷酸二氫鉀，1.22g磷酸氫二鉀，用1000mL水溶解。臨用前按0.5g/100mL加入抗壞血酸。4.3.2磷酸鹽緩沖液Ⅱ（用于谷物及谷物制品前處理）：稱取14.2g磷酸氫二鈉，用1000mL水溶解。臨用前按1.0g/100mL加入抗壞血酸，用氫氧化鈉溶液
5、A（4.16）調(diào)pH至7.8±0.1。4.3.3磷酸鹽緩沖液III（用于谷物及谷物制品測(cè)試）：稱取14.2g磷酸氫二鈉，用1000mL水溶解。臨用前按1.0g/100mL加入抗壞血酸，用氫氧化鈉溶液A（4.16）調(diào)pH至6.8±0.1。4.3.4磷酸鹽緩沖液Ⅳ（0.1mol/L）（用于谷物及谷物制品標(biāo)準(zhǔn)溶液制備）：溶解13.61g磷酸二氫鉀于水中稀釋到1000mL。用氫氧化鉀溶液（4.10）調(diào)pH至7.0±0.1。4.4葉酸標(biāo)準(zhǔn)品。4.5氨水（10.8%）。4.6甲苯（C7H8）。4.7抗壞血酸（C6
6、H8O6）。4.8菌株：干酪乳桿菌（Lactobacilluscasei）ATCC7469。1GB5413.16—20104.9培養(yǎng)基4.9.1乳酸桿菌瓊脂培養(yǎng)基：胨化乳15g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，番茄汁100mL，磷酸二氫鉀2g，聚山梨糖單油酸酯1g，瓊脂10g，加蒸餾水至1000mL，調(diào)pH至6.8±0.2（20℃～25℃）。121℃高壓滅菌15min，備用。4.9.2乳酸桿菌肉湯培養(yǎng)基：胨化乳15g，酵母浸膏5g，葡萄糖10g，番茄汁100mL，磷酸二氫鉀2g，聚山梨糖單油酸酯1g，加蒸
7、餾水至1000mL，調(diào)pH至6.8±0.2（20℃～25℃）。121℃高壓滅菌15min，備用。4.9.3葉酸測(cè)定用培養(yǎng)基：酪蛋白胨10g，葡萄糖40g，乙酸鈉40g，磷酸氫二鉀1g，磷酸二氫鉀1g，DL-色氨酸0.2g，L-天門冬氨酸0.6g，L-半胱氨酸鹽酸鹽0.5g，硫酸腺嘌呤10mg，鹽酸鳥嘌呤10mg，尿嘧啶10mg，黃嘌呤20mg，聚山梨糖0.1g，谷光甘肽5mg，硫酸鎂0.4g，氯化鈉20mg，硫酸亞鐵20mg，硫酸錳15mg，核黃素1mg，p-氨基苯甲酸2mg，維生素B64mg，鹽酸硫
8、胺素400μg，泛酸鈣800μg，煙酸800μg，生物素20μg，加蒸餾水至1000mL，調(diào)pH至6.7±0.1（20℃～25℃）。注：市售商業(yè)化合成培養(yǎng)基效果更穩(wěn)定。4.10氫氧化鉀溶液（4mol/L）：稱取224g氫氧化鉀于1000mL燒杯中，用400mL水溶解，冷卻至室溫后，轉(zhuǎn)移至1000mL容量瓶中，用水定容。4.11木瓜蛋白酶溶液：1g蛋白酶（活力≥6000U/mg，pH6.0±0.1，40℃）溶于100mL磷酸鹽緩沖液Ⅰ（4.3.1）中。臨用
