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《復(fù)方五仁醇膠囊保肝作用的血清藥理學(xué)研究》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、復(fù)方五仁醇膠囊保肝作用的血清藥理學(xué)研究作者：張兵，竇志華，羅琳，達坤林，尤蝠儀，曹衛(wèi)菊【摘要】目的：建立復(fù)方五仁醇膠囊血清藥理學(xué)研究方法。方法：建立CCl4誘導(dǎo)的原代培養(yǎng)大鼠肝細胞損傷模型，大鼠為含藥血清供體，以含藥血清對損傷肝細胞增殖（MTT法）及丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）泄漏的影響兩個指標，結(jié)合含藥血清中五味子乙素的含量測定，分別采用單因素考察、多因素的正交試驗，優(yōu)選含藥血清的制備方法，并確定體系中血清添加量。結(jié)果：每天以成人等效劑量10倍的甲醇提取物間隔8h分兩次給正常大鼠灌胃給藥，連續(xù)3天，末次
2、給藥后2h采血制備含藥血清比較合理，體系中加入10%該條件下制備的含藥血清能明顯提高損傷肝細胞的增殖能力、降低細胞ALT泄漏。結(jié)論：適宜條件下制備的復(fù)方五仁醇膠囊含藥血清對肝細胞損傷具有明顯的保護作用，血清藥理學(xué)研究方法可以用于該制劑的藥效評價。【關(guān)鍵詞】復(fù)方五仁醇膠囊；保肝作用；含藥血清；血清藥理學(xué)[Abstract]Objective：ToestablishaserumpharmacologytestingmethodforpoundaryculturehepatocytecontainingCTT
3、),alanineaminotransferase(ALT)incellculturemediumandthecontentofschisandrininserumasindices,single-factorinvestigationandmultiple-factororthogonalexperimentorplasma,andserumcontainingdruginculturesystemofdifferentconcentrationonpharmacologicaleffectandto
4、screenofthepreparativemethodofserumcontainingdruganditssuitableconcentrationinculturesystem.Results：Normalratsasthedonatorofserum,usingmethanolicextractofCRESCO公司分裝）；膠原酶IV（美國Sigma公司分裝）；胰蛋白酶（美國Sigma公司分裝）；DMEM培養(yǎng)基（美國GIBCO公司）；新西蘭新生小牛血清（美國HyClone公司）；四氯化碳（宜興市第
5、二化學(xué)試劑廠）；溴化3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑藍（MTT，AMRESCO公司）；五味子乙素（中藥固體制劑制造技術(shù)國家工程研究中心）；復(fù)方五仁醇膠囊（本院自制）。1.1.3儀器HERAcellCO2培養(yǎng)箱（德國GmbH公司）；BIO-TEK340酶標儀（美國Sigma公司）；日立7170全自動生化分析儀（日本日立公司）；Agilent1100Series高效液相色譜儀（美國Agilent公司）。1.2方法1.2.1大鼠灌胃用藥物的處理取復(fù)方五仁醇膠囊內(nèi)容物，加0.5%CMC-Na制成
6、混懸液。另取復(fù)方五仁醇膠囊內(nèi)容物，甲醇回流提取，加0.5%CMC-Na制成混懸液。1.2.2肝細胞的分離與培養(yǎng)按1.2.6統(tǒng)計學(xué)方法使用Stata7.0統(tǒng)計軟件包進行數(shù)據(jù)處理。數(shù)據(jù)以x±s表示，用方差分析處理數(shù)據(jù)。2結(jié)果2.1含藥血清制備方法考察Ⅰ：給藥形式及劑量考察與正常對照組相比，模型對照組MTT值顯著下降（P<0.01）、ALT顯著升高（P<0.01），說明造模獲得成功；與模型對照組比較，除提取物小劑量組MTT值無顯著差異外（P>0.05），其余各試驗組MTT值均明顯升高（P&l
7、t;0.01或P<0.05），ALT明顯下降（P<0.01或P<0.05）；與提取物中劑量組比較，等劑量灌胃制備的制劑原形組MTT值及ALT差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)果提示，制劑的甲醇提取物與制劑原形具有等效性，且3個劑量組不存在明顯的量效關(guān)系。故確定以成人臨床等效劑量10倍的甲醇提取物給大鼠灌胃制備含藥血清。見表2。2.2含藥血清制備方法考察Ⅱ：其他條件的正交試驗考察將各試驗組3個指標的測定結(jié)果分別按百分制轉(zhuǎn)換成積分（MTT、五味子乙素以最高為100，ALT以倒數(shù)計
8、算，最高為100），綜合加權(quán)評分（MTT、ALT、五味子乙素分別占35%、35%和30%）后進行統(tǒng)計分析。結(jié)果見表3。方差分析結(jié)果顯示，C因素（取血時間）對結(jié)果有極顯著影響（P<0.01），B因素（給藥間隔時間）有顯著影響（P<0.05），且兩者之間存在交互作用（B×C之P<0.05，交互作用分析顯示最佳組合為B1C1），血漿的影響優(yōu)于血清，但無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），而動物是否造模幾乎沒有影響（見表4）。因此，
