棗花丹合劑對(duì)小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用的實(shí)驗(yàn)研究

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1、棗花丹合劑對(duì)小鼠鎮(zhèn)靜催眠作用的實(shí)驗(yàn)研究【關(guān)鍵詞】棗花丹合劑;鎮(zhèn)靜;催眠;小鼠 棗花丹合劑是在借鑒臨床各類鎮(zhèn)靜催眠藥物的基礎(chǔ)上由酸棗仁、落花生枝葉、丹參經(jīng)一定組方組合而成。此復(fù)方已經(jīng)臨床證實(shí)可以顯著地增加人夜間慢波睡眠時(shí)間[1],但其治療療效尚不確切,且缺乏基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究的相關(guān)資料,故需做進(jìn)一步深入研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)藥物對(duì)小鼠行為學(xué)活動(dòng)的影響來(lái)觀察棗花丹合劑對(duì)正常小鼠的鎮(zhèn)靜催眠作用?! ?材料與儀器  1.1動(dòng)物昆明種小鼠265只,體質(zhì)量(20±2)g,雄性,由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供?! ?.2儀器YLS-1A多功能自主活動(dòng)儀購(gòu)自山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站。電子分析天平,上海天平儀器廠生產(chǎn),

2、型號(hào):JA5003。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海安亭電子儀器廠生產(chǎn),型號(hào)ZFQ-85A。離心機(jī)珠海黑馬儀器有限公司生產(chǎn),型號(hào)1M1015B?! ?.3藥品與試劑炒酸棗仁、落花生枝葉、丹參(以上各藥均購(gòu)自寧夏中醫(yī)研究院)。戊巴比妥鈉、3-巰基丙酸(3-MP)均購(gòu)自Sigma公司。地西泮注射液(Diazepam,DZ):上海旭東海普藥業(yè)有限公司?! ?方法  2.1動(dòng)物分組將265只小鼠隨機(jī)分為5組:棗花丹合劑大劑量組(ZHD大劑量組)、棗花丹合劑中劑量組(ZHD中劑量組)、棗花丹合劑小劑量組(ZHD小劑量組)。安定組、生理鹽水組。每組45只,各組又隨機(jī)分為A、B、C三個(gè)小組,每小組15只。依據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)所測(cè)

3、得ZHD最大耐受量為45g/kg,以45g/kg為高劑量組,再以稀釋至最大耐受量的1/2作為中劑量組,1/4作為低劑量組,將ZHD分為大、中、小劑量組,分別給予45,22.5,11.25g/kg·d棗花丹合劑灌胃。安定組按4mg/kg·d灌胃。生理鹽水組灌服與其它組等容積生理鹽水,各組連續(xù)給藥7d,2次/d,于末次給藥前8h禁食,前1h禁水,于末次給藥30min后開(kāi)始記錄小鼠睡眠時(shí)間、自主活動(dòng)等指標(biāo)。小鼠每次灌胃劑量為:0.4ml/20g?! ?.2觀察指標(biāo)  2.2.1小鼠自主活動(dòng)次數(shù)小鼠連續(xù)灌胃7d,于末次給藥30min后將各不同劑量組中A小組15只小鼠置于ZYC-1型自主活動(dòng)儀內(nèi)(

4、每臺(tái)同時(shí)觀測(cè)5只小鼠),測(cè)小鼠的自主活動(dòng)次數(shù),實(shí)驗(yàn)要求在安靜、光線較暗的環(huán)境中檢測(cè)。小鼠適應(yīng)環(huán)境5min,計(jì)數(shù)10min內(nèi)小鼠的的活動(dòng)次數(shù),并進(jìn)行各組對(duì)比?! ?.2.2小鼠戊巴比妥鈉閾下劑量協(xié)同實(shí)驗(yàn)對(duì)ZHD高中低不同劑量組的B小組小鼠分別灌胃45,22.5和11.25g/kg的,30min后給小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉20mg/kg,觀察20min內(nèi)小鼠翻正反射消失1min以上的動(dòng)物數(shù)并計(jì)算睡眠小鼠百分率?! ?.2.3戊巴比妥鈉的小鼠的潛伏期及睡眠時(shí)間給所有的B組小鼠灌胃給藥,30min后給小鼠腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg,觀察睡眠小鼠數(shù)以計(jì)算睡眠小鼠百分率,并記錄入睡小鼠的睡眠時(shí)間

5、(翻正反射消失到恢復(fù)的時(shí)間為睡眠時(shí)間。翻正反射消失達(dá)1min以上者確定為陽(yáng)性,即已入睡)?! ?.2.4小鼠抗驚厥實(shí)驗(yàn)對(duì)各不同劑量組的C小組小鼠連續(xù)給藥7d,于末次給藥30min后腹腔注射20μl/kg劑量的3-MP,觀察有無(wú)驚厥現(xiàn)象的發(fā)生,計(jì)算其驚厥的發(fā)生率,以證實(shí)棗花丹合劑無(wú)鎮(zhèn)靜作用?! ?.2.5數(shù)據(jù)處理所得數(shù)據(jù)均用±s表示。用SPSS10.0軟件單因素方差分析,方差不齊時(shí)用非參數(shù)法進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。  3.3對(duì)注射閾劑量戊巴比妥鈉的小鼠睡眠時(shí)間的影響結(jié)果見(jiàn)表3。表3對(duì)戊巴比妥鈉閾劑量睡眠時(shí)間的影響由表2可以看出與陰性對(duì)照組比較,ZHD高劑量組可顯著延長(zhǎng)戊巴比妥鈉睡眠時(shí)間(P<

6、0.01),同時(shí)可縮短睡眠潛伏期時(shí)間(P<0.05)。此外,與安定組相比高劑量組與安定組無(wú)顯著性差別(P>0.05),表明ZHD高劑量組的鎮(zhèn)靜催眠作用與安定0.004g/kg時(shí)作用相當(dāng)。  3.4對(duì)注射3-MP后小鼠驚厥程度影響結(jié)果見(jiàn)表4。表4抗驚厥試驗(yàn)結(jié)果從表4可以看出,與陰性對(duì)照組(生理鹽水組)相比(P<0.01),表明ZHD高劑量組和安定組小鼠的驚厥發(fā)生數(shù)顯著減少,提示ZHD高劑量組有一定的鎮(zhèn)靜作用?! ?討論  棗花丹合劑(ZHD)是由酸棗仁、落花生枝葉、丹參經(jīng)一定組方組合而成的復(fù)方合劑,酸棗仁為祖國(guó)醫(yī)學(xué)傳統(tǒng)鎮(zhèn)靜、催眠主藥[2],具有鎮(zhèn)靜、催眠作用的機(jī)理[3,4

7、]。王翹楚實(shí)驗(yàn)和臨床證實(shí)落花生枝葉也有較好的鎮(zhèn)靜、催眠作用[5]。丹參為祖國(guó)醫(yī)學(xué)活血化瘀、增加血腦屏障通透性藥,古人曰“丹參一味,功同四物”[6]。近年許多學(xué)者研究證實(shí)丹參與某些麻醉藥品合用,不僅具有增強(qiáng)麻醉鎮(zhèn)靜的作用,而且也有鎮(zhèn)靜催眠作用[7]?! ”緦?shí)驗(yàn)選取小鼠自主活動(dòng)次數(shù)與抗驚厥作用作為鎮(zhèn)靜作用的代表指標(biāo),選取小鼠睡眠時(shí)間、小鼠睡眠潛伏期、小鼠睡眠百分率作為催眠作用的代表指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,隨著給藥劑量的增大小鼠自主活動(dòng)次數(shù)呈

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