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1、溶菌酶結(jié)晶的制備及活力測(cè)定研究制藥工程2011級(jí)制藥11班XXX指導(dǎo)老師XX摘要目的：探討溶菌酶結(jié)晶的制備及活力測(cè)定的方法。方法：以蛋清為原料制備溶菌酶結(jié)晶，首先將雞蛋屮的蛋清與蛋黃分離，取蛋清，然后用處理好的“724”樹(shù)脂吸附，接著用蒸憾水洗滌，再經(jīng)樹(shù)脂洗脫，將所需物質(zhì)與雞蛋清中的其他蛋白質(zhì)分離，然后再經(jīng)鹽析、純化處理所得到的溶菌酶即可得結(jié)晶。將所得酶和底物分別放入25°C恒溫水浴預(yù)熱10分鐘，吸取底物懸浮液4mL放入比色杯中，在450nm波長(zhǎng)讀出吸光度，此為零時(shí)讀數(shù)。然后吸取樣品液0.2mL(相當(dāng)于10pg酶)，每隔30s讀1次吸光度，共計(jì)下四個(gè)讀數(shù)。結(jié)果：無(wú)結(jié)晶生成。結(jié)論：溶菌
2、酶結(jié)晶的制備及活力測(cè)定研究實(shí)驗(yàn)以失敗告終。關(guān)鍵詞：溶菌酶結(jié)晶活力測(cè)定ThePreparationOfLysozymeCrystallizationAndActivityAssayPharmaceuticalEngineering2011ZhenlinWeiSupervisorWeiminAbstractGold:tostudythelysozymecrystallizationmethodofpreparationandactivityassay.Methods:witheggwhitelysozymecrystallizationasrawmaterialpreparation,f
3、irstofall,separatetheeggsintheeggwhiteandyolk,eggwhite,a”724”andthenuseprocessingresinadsorption,thenwashingwithdistilledwater,thenthroughresinelution,therequiredmaterialandotherproteinseparationofeggqingdynasty,andthenreceivedbysaltingout,purificationprocessingoflysozymecrystallization.Putthee
4、nzymeandsubstraterespectivelyin25OCpreheatconstanttemperaturewaterbathfor10minutes,drainthesubstratesuspension4mlintocolorimetriccup,readtheabsorbaneeat450nmwavelength,thisiszeroreadings.Thenabsorbstheliquidsample0.2mL(equivalentto10(includinggenzyme),every30sread1absorbanee,atotaloffourreading
5、s.Results:nocrystallizationgenerated.Conelusion:thepreparationoflysozymecrystallizationanddynamicmeasurementexperimentendedinfailure?Keywords:lysozymecrystallizationactivityassay、八、■冃UH溶菌酶（Lysozyme,EC3.2.1.17）是一種專(zhuān)門(mén)作用于微生物細(xì)胞壁的水解酶，又稱(chēng)細(xì)胞壁溶解酶（Muramidase）,是由英國(guó)細(xì)菌學(xué)家弗萊明（Fleming）在192年在人的眼淚、唾液中發(fā)現(xiàn)的［1］。溶菌酶廣泛
6、存在于鳥(niǎo)類(lèi)和家禽的蛋清中，哺乳動(dòng)物的淚液、唾液、血漿、尿、乳汁、其它體液（如淋液）中及白細(xì)胞和組織（如肝、腎）細(xì)胞內(nèi)，而且部分植物、微生物屮也含冇此酶［2］。其中人溶菌酶的活性是最高的，大約為雞蛋清溶菌酶酶活力的3倍。但是蛋清中溶菌酶含量最豐富，約為0.3%-0.4%左右，而且蛋清來(lái)源廣泛，因此多數(shù)商品溶菌IW是從蛋清中提取的［3］。李鶴等在食品研究與開(kāi)發(fā)中提到了溶菌酶已確定的三種作用：1）將溶菌酶固定化在食品包裝材料上，生產(chǎn)出有抗菌功效的食品包裝材料，以達(dá)到抗菌保鮮功能。2）將溶菌酶固定化在HEPA（空氣過(guò)濾器）上，作為空調(diào)的空氣凈化系統(tǒng)，使其具有高效除塵和殺菌兩大功能。當(dāng)空氣通過(guò)
7、濾網(wǎng)時(shí)，先濾集捕捉塵粒和細(xì)菌，然后將捕捉到的細(xì)菌殺滅［4］。3）用溶菌卿非專(zhuān)一?性地降解海洋生物高分子殼聚糖，使其成為能被人體吸收的低分子量具冇獨(dú)特生理活性和功能性質(zhì)的低聚殼聚糖［5］。近幾年，溶菌酶被廣泛運(yùn)用于醫(yī)約、食品行業(yè)。溶菌酶作為一種天然蛋白質(zhì)，能在胃腸內(nèi)作用于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被消化和吸收，對(duì)人體無(wú)毒性，也不會(huì)在體內(nèi)殘留，是一種安全性很高的食品保鮮劑、營(yíng)養(yǎng)保健品和藥品［8］o溶菌酶可用于各種加工食詁或飲料制作屮，集藥理、保健和防腐三種功能于一體［10］o因
